選擇保護(hù)柱的原則是:在滿足分析分離要求的前提下,盡可能的選擇較短的保護(hù)柱結(jié)構(gòu),對分離樣品有比較小的保留性的色譜填料。
在選擇保護(hù)柱之前首先要考慮的是樣品是否清潔。對于大部分分析工作來說,一支1cm長的保護(hù)柱便能提供充分的保護(hù)作用。但是,如果樣品非常不清潔,或工作中要經(jīng)常更換保護(hù)柱,那么就應(yīng)該選擇2cm或3cm長的保護(hù)柱。但是,隨著保護(hù)柱的加長,保留時(shí)間也會變長。
一般來說,保護(hù)柱填料的選擇是由分析柱的填料決定的,正常情況下可以選擇與分析柱一樣的色譜填料,但是,根據(jù)實(shí)際工作的需要,也可以不必與分析柱的填料完全匹配。
當(dāng)滿足下列條件之一時(shí)就應(yīng)該更換保護(hù)柱:
a、色譜柱的理論塔片數(shù)下降15%以上;
b、色譜柱柱前壓上升15%以上;
c、最難分離的物質(zhì)對分辨率下降15%以上;
d、樣品進(jìn)樣次數(shù)超過150次;
e、流動相通過1500倍的色譜柱體積。