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使用高效液相色譜(HPLC)分析樣品廣泛應用于藥物成分分析、食品添加劑測定和環(huán)境樣品測試是目前普遍的一個方法。由于液相色譜柱在許多實驗室中是核心設備且價格昂貴,因此保護其免受損壞是延長色譜柱壽命和降低成本的首要考慮因素。維護良好的色譜柱還可產生一致、準確的數據,支持可靠的分析結果。
1.如何提高色譜柱的性能?
色譜柱性能取決于許多因素,包括樣品特性、不溶性顆粒的存在以及使用后的清潔和維護。然而,并非所有的實驗條件在使用期間都是理想的。例如,一些樣品具有苛刻但必要的pH條件。因此,液體分析柱的預防性維護程序有助于最大限度地延長色譜柱壽命并保持HPLC效率。
2.哪些因素會影響色譜柱壽命?
常見的HPLC問題包括柱背壓增加、泄漏和無法保持一致的流速。未過濾樣品或流動相中的顆粒會導致這些問題,任何進入HPLC系統(tǒng)的物質都有可能將顆粒物質引入色譜柱基質,從而縮短色譜柱的使用壽命。因此,樣品必須經過預處理,使用前也需要用溶劑過濾器過濾流動相。
流動相的過濾和脫氣將去除微粒和溶解氣體,確保它們不會到達并損壞色譜柱。如果流動相含有來自溶解固體材料的緩沖鹽或改性劑,則過濾尤其重要。泵低壓進口側使用的恒譜生HPLC溶劑進口過濾器有助于保護止回閥、進樣器和色譜柱免受有害顆粒污染物的影響。將此步驟添加到例程中可以幫助減少色譜圖中的基線噪聲。
使用在線過濾器和保護柱也有助于防止顆粒進入系統(tǒng)和護柱。色譜柱是液相系統(tǒng)中的一個關鍵組件,這些色譜柱保護器的使用取決于應用,需要一個或兩個。恒譜生的色譜保護柱是一種短柱,樣品和流動相在進入主柱之前通過該柱,有助于在到達分析柱之前去除雜質和懸浮固體。保護柱的使用取決于具體應用,當色譜行為發(fā)生變化時,如背壓、保留時間或峰加寬的變化,需要定期更換。
實驗中還需要考慮樣品和流動相的兼容性,因為一些樣品組分會與某些溶劑發(fā)生反應。例如,醛和酮與氨基流動相反應。避免反應性組合有助于保護色譜柱免受損壞。